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NIH-3T3-GFP小鼠成纖維綠色標記|NIH-3T3細胞
發布時間:2020-11-13   點擊次數:177次

上海免费可以看污动画网站實業有限公司經過數年的努力發展已迅速成為集產品研發、生產、經營為一體的專業化生物工程公司。公司新引進細胞上千株,其中人的已通過STR鑒定的有幾百株,歡迎各位選購。。。。。。

 

產品名稱:NIH-3T3-GFP小鼠成纖維綠色標記|NIH-3T3細胞

包裝:內層無菌自封袋;防壓泡沫盒;外層防壓保溫氣泡袋;說明書

細胞來源:ATCC、sciencell、ICLC

貨期:1-2周

運輸方式:快遞運輸

售後:收到細胞後12天,如發現細胞有質量問題(如汙染,死亡,快遞運輸等原因)時,應出具書麵質量問題報告並及時通知銷售人員,免费可以看污动画网站將盡快為您解決!

NIH-3T3-GFP小鼠成纖維綠色標記|NIH-3T3細胞

三、細胞生長條件:

 

一、組成:

組份 數目

細胞 1 T-25瓶

細胞說明書 一份

二、細胞簡介:

生長特性: 貼壁生長

 

細胞來源: 從ATCC/中科院/協和醫院等地引進

培養條件: 培養基:1640 +10%FBS(推薦德國BI 04-002-1A

優等胎牛血清)

氣相:空氣95%,二氧化碳5%

溫度:37℃

培養: 一、貼壁細胞

1.用75%酒精噴灑整個瓶消毒,將其平躺置於培養箱中進行2-3小時的緩衝,.然後置於無菌操作台,打開瓶口,將其中的培養液去掉,再往其中加入5-6mL新鮮培養基並置於細胞培養箱中培養,根據細胞生長狀況及培養基顏色變化對其進行換液以及傳代;

2.待細胞長滿瓶底麵積80%-90%,需要對其進行傳代,di一次傳代比例為1:2。

3傳代步驟:將0.25%含EDTA胰酶置於37°預熱,倒掉培養瓶中的培養基,往培養瓶中加入1mlPBS,輕晃洗滌後棄去。往瓶中加1ml預熱好的胰酶,置於37°孵育消化(di一次消化需時常取出置於顯微鏡下觀察,以顯微鏡下細胞觸角回收變圓、輕拍瓶壁見細胞脫落為佳消化時間,記錄佳消化時間,以便於下次消化),消化好後加入1ml完全培養基終止消化。用移液槍輕輕吹打瓶壁上的細胞,使之完全脫落,然後收集細胞懸液,1200rpm離心3min,棄上清,加入完全培養基重懸細胞,進行傳代。

 

二、懸浮細胞

1.用75%酒精噴灑整個瓶消毒,然後置於無菌操作台,打開瓶口,輕輕吹打後,將其中的細胞懸液轉移到離心管中,然後1200rpm離心3min,去上清;

2.將離心好的細胞轉移至T-25瓶中,並加入5-6mL新鮮培養基,然後將其置於細胞培養箱中培養,根據細胞生長狀況及培養基顏色變化對其進行換液(離心後去舊液,加入新鮮培養基);

3.顯微鏡觀察細胞數目比較多時,對其進行傳代,di一次傳代比例為1:2(離心後平均分成兩瓶培養)。

 

細胞總數: 1~3*106

傳代周期: 2-3天

傳代比例: 1:2~1:4

換液頻率: 2-3天

凍存液: 90%FBS+10%DMSO

 

四、注意事項:

1 收到細胞後首先觀察T-25瓶是否有損壞、漏液、渾濁等現象,若有上述現象發生請及時和免费可以看污的网站聯係。

2 瓶中運輸的培養液不能重複使用,請換新鮮培養液培養

3 對於貼壁細胞,若大部分細胞漂浮,置於培養箱隔夜觀察,大部分漂浮細胞重新貼壁,表明細胞活力正常,繼續培養,剩餘漂浮的細胞可以去掉;若大部分細胞仍然不貼壁,將漂浮的細胞離心收集,用台盼藍染色鑒定細胞活力,並與本公司銷售人員及時聯係。

4 建議客戶收到細胞後不同倍鏡各拍幾張細胞的照片,記錄細胞狀態,如細胞狀態出現問題請於72h內與本公司銷售聯係,以便於更好的幫您解決問題,超過時間我段,本公司則默認細胞狀態良好,不免費對後續細胞狀態問題進行售後。

 

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選擇上海免费可以看污动画网站生物細胞有3個理由:

1、細胞狀態好,形態佳,易成活,是市麵上比較好養的細胞之一;

2、物流迅速,複蘇好後發貨,次日就能到;

3、使用我司推薦的進口品牌血清進行培養實驗,效果更佳。

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專業技術人員萬工收藏的細胞培養小技巧:

1. 買細胞要去靠譜的地方買,比如 ATCC 或者上海免费可以看污app。一般上麵會有針對細胞的介紹,這樣培養之前可以了解細胞正常生長的狀態圖、傳代、培養基的類型等。

2. 不管是買的細胞,還是別人惠贈的細胞,剛拿到手趕緊的做兩件事:檢測是否有支原體汙染;迅速擴增凍存,凍存細胞複蘇後第二天蕞好更換一次培養基。

3. 發現細胞有汙染迅速處理掉,特別是當你養了很多種細胞時。細菌汙染、真菌汙染很容易發現,支原體汙染的話,細胞會長的慢,可以買個支原體檢測的試劑盒定期檢測一下。

4. 不同細胞生長周期不同。有的生長很快,比如說 MDA-MB-231,傳代的時候取離心懸液的十分之一就已經足夠了。有的又是特別慢,比如 BT474,傳代是一分二,複蘇起始的時候兩周多才能長滿。這就需要要在培養細胞的過程中多多摸索。

5. 對於嬌弱的細胞,就得細心嗬護。胰酶消化不能過久,吹得時候要輕柔,離心時候也要注意轉速和時間。每天都要去看一下細胞,肉眼觀察培養基狀況、顯微鏡下觀察細胞生長狀況。記住,是每天。

 

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