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L1210細胞|L1210/DDP小鼠白血病順鉑耐藥株培養步驟
發布時間:2020-11-10   點擊次數:190次

L1210細胞|L1210/DDP小鼠白血病順鉑耐藥株培養步驟

【背景資料】 見細胞說明書
【產品來源】 細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國內外著名大學建係
"公司提供貼壁、半貼壁、懸浮、半懸浮、貼壁與懸浮混合等細胞特性,一般細胞培養PBS量是10%,如果出現細胞狀態不良情況,可以提高PBS量到15%,SHEE人永生化食管上皮細胞待細胞穩定後,調回PBS量10%,對於初次實驗者,一般細胞培養,都需要加入雙抗防止細胞汙染,細胞匯合度達到90%,免费可以看污动画网站開始寄送,這樣可以保持細胞收到時,良好的細胞活力。
一、售前
         上海免费可以看污的视频网站實業專業為國內科研提供高品質細胞和優質服務,QC檢測合格後發貨保證細胞狀態良好,發貨前保證質量。
 
二、售後
         收到細胞7天內出現狀態不佳等情況請及時反饋,會有技術同步指導操作協助解決,如仍未養活免費重發。建議及時保種,有備無患!
 
三、細胞生長條件:
培養條件   
GIBCO(培養基90% +10%FBS)
溫度                   
                    37℃
空氣條件  
5% CO2,,95% AIR
傳代方法
1:2傳代,2~3天換液
凍存條件
90%FBS+10%DMSO
 
四、細胞收到後處理
    細胞在培養瓶中培養至良好狀態後灌滿完全培養液並封好瓶口是細胞運輸的好辦法。收到細胞回到自己的實驗室後,先打開外包裝,用75%酒精噴灑整個瓶消毒後放到超淨台內,嚴格無菌操作。鏡下觀察:未超過80%匯合度時,可將瓶裝的完全培養液移入廢液缸中,原瓶(T25瓶)保留6-8ml完全培養液,懸浮細胞需離心處理,放入37℃、5%CO2孵箱培養;超過80%匯合度時,根據情況傳代或者凍存,具體操作見細胞培養步驟。

 

本公司生產的小鼠甲狀腺濾泡上皮細胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法,並通過上皮細胞培養基培養篩選製備而來,細胞總量約為5×10^5cells/瓶;細胞經PCK/TG免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

 

參數規格

 

1) 來源:甲狀腺

 

 

 

2) 形態:上皮細胞樣

 

 

 

3) 含量:>1x106 個/mL

 

 

 

4) 汙染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性

 

 

 

5) 規格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

產品相冊

 

 

 

可選擇幹冰運輸及發送複蘇存活細胞方式:

 

 

 

(1)幹冰運輸,收到後立即轉入液氮或者-80度冰箱凍存或直接複蘇;

 

 

 

(2)存活細胞,收到後應繼續生長,傳代達到細胞生長狀態良好時,再進行凍存。具體操作見細胞培養步驟。

 

 

 

(3)收到細胞後請拍照,3天內如果發現汙染,請及時拍照與免费可以看污的网站聯係。

 

 

 

用途:僅供科研使用。

 

L1210細胞|L1210/DDP小鼠白血病順鉑耐藥株培養步驟

 

小鼠胚胎幹細胞接收後的處理:

 

 

 

1) 收到細胞後,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發給免费可以看污app。

 

 

 

2) 請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態,去掉封口膜並將T25瓶置於37℃培養約2-3h。

 

 

 

3) 棄去T25瓶中的培養基,添加6ml新的完全培養基。

 

 

 

4) 如果細胞長滿(90%以上)請及時進行細胞傳代。

 

 

 

5) 接到細胞次日,請檢查細胞是否汙染,若發現汙染或疑似汙染,請及時與免费可以看污的视频网站取得聯係。

 

 

 

 細胞培養步驟

 

 

 

一.培養基及培養凍存條件準備:

 

 

 

1) 準備L-15培養基;優質胎牛血清,10%;雙抗,1%。

 

 

 

2) 培養條件: 氣相:空氣,100%。 溫度:37攝氏度。

 

 

 

3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。

 

A。僅供研究之用。

 

運輸保存:采用幹冰保存運輸。收到細胞時,若幹冰已經完全融化,請立即將細胞複蘇培養;若尚留有幹冰,請立即將細胞放入液氮中保存待用,請按條件貯存細胞,切不可將細胞置於高溫環境。

 

OSKM-1小鼠誘導型多能幹細胞一般培養方法:

 

1、組織塊培養法

 

A)按照前述方法取材,將組織剪成或切成1mm3大小的小塊,並加入少許培養基使組織濕潤。

 

B)將小塊均勻塗布於瓶壁,每小塊間距0.2 cm~12.5px,一般在25mL培養瓶(底麵積為437.5px2)可接種20~30小塊為宜,小塊放置後,輕輕翻轉培養瓶,使瓶底朝上,然後於瓶內加入適量培養基蓋好瓶塞,將瓶傾斜放置在37℃溫箱內。

 

C)培養2~4小時,待小塊貼附後,將培養瓶緩慢翻轉平放,靜置培養,動作要輕,嚴禁搖動和來回振蕩,以防小鼠誘導型多能幹細胞由於衝動而使小塊漂起而造成培養失敗,若組織塊 不易貼壁可預先在瓶壁塗一薄層血清、胎汁或鼠尾膠原等。開始培養時培養基不宜多,以保持組織塊濕潤即可,培養24小時後再補液,培養初期移動和觀察時要輕 拿輕放,開始幾天盡量不去搬動,以利貼壁和生長,培養3~5天時可換液,一方麵補充營養,一方麵去除代謝產物和漂浮小塊所產生的毒性作用。

 

2、消化培養法

 

該方法是采用前述的消化分散法,將妨礙細胞生長的細胞間質(包括基質、纖維等)去除,使細胞分散形成細胞懸液,然後分瓶培養。

 

3、懸浮細胞培養法

 

對於懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經淋巴細胞分層液分離後接種培養。

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